作者：电泳设备中电泳呈现拖尾现象，英文成为smear，就是弥散。其原因，主要从以下两个方面考虑：1、PCR产品本身原因：往往由于酶量过多或酶的质 来源： 发布时间：2020-10-13 12:43:47 浏览量：
电泳设备中电泳呈现拖尾现象，英文成为smear，就是弥散。其原因，主要从以下两个方面考虑：
1、PCR产品本身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，
退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产品过多。
对策：
①削减Taq酶的量，或调换另一来源的酶。
②削减dNTP的浓度。
③恰当下降Mg2+浓度。
④添加模板量，削减引物的用量，削减循环次数，提高退火温度。
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液TAE或许TBE的污染，建议替换缓冲液。
（2）上样时样品漂了，建议添加上样缓冲液的用量，以及当心加样。
（3）电压太高。
（4）恰当把你的胶的浓度加大。（根据你的片断巨细而定）
（5）调查你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照。
PCR拖尾及假阳性的原因及对策
拖尾现象：产品在凝胶上呈Smear状态。
原因：
1.模板不纯
2.Buffer不合适
3.退火温度偏低
4.酶量过多
5.dNTP、Mg2+浓度偏高
6.循环次数过多
对策：
1.纯化模板
2.替换Buffer
3.恰当提高退火温度
4.适量用酶
5.恰当下降dNTP和镁离子的浓度
6.削减循环次数
假阳性
现象：空白对照呈现意图扩增产品
原因：
靶序列或扩增产品的穿插污染
对策：
1.操作时应当心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅起离心管外；
2.除酶及不能耐高温的物质外，一切试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及加样枪头号均应一次性运用。
